Репортёрный ген: различия между версиями
Перейти к навигации
Перейти к поиску
| [отпатрулированная версия] | [отпатрулированная версия] |
Содержимое удалено Содержимое добавлено
Sirozha (обсуждение | вклад) |
отмена правки 116310621 участника 185.253.40.150 (обс.) - почти два года провисело; +лаконичность |
||
| (не показана 21 промежуточная версия 9 участников) | |||
| Строка 1: | Строка 1: | ||
''' |
'''Репортёрные гены''' (гены-репортёры, {{lang-en|reporter gene}}) в [[молекулярная биология|молекулярной биологии]] — [[гены]], которые присоединяют к регуляторным последовательностям других генов для исследования проявлений генов в [[культура клеток|культурах клеток]]. Некоторые репортёрные гены используются исследователями, так как их [[экспрессия генов|экспрессия]] придаёт организму чётко выраженные легко измеряемые характеристики, некоторые, — так как они являются селективными [[ДНК-маркер|маркерами]]. Репортёрные гены используют для того, чтобы определить уровень экспрессии гена в [[Клетка|клетке]] или в [[популяция|популяции]]. Часто в [[Генетическая инженерия|генно-инженерные]] конструкции встраивают в качестве репортёра ген ''[[Лактозный оперон|LacZ]]''. |
||
== Применение == |
== Применение == |
||
Интересующий исследователя ген и ген- |
Интересующий исследователя ген и ген-репортёр обычно встраивают в одну генетическую конструкцию, а затем вводят её в клетку или организм. В случае клеток [[Бактерии|бактерий]] и [[Эукариоты|эукариот]] для введения обычно используют кольцевые молекулы ДНК — [[плазмиды]]. Важно, чтобы ген-репортёр в норме не экспрессировался в клетке, тогда его экспрессия будет означать, что интересующий ген попал в клетку. |
||
Широкое применение находят репортёрные гены, кодирующие [[Флуоресценция|флуоресцентные]] и [[Биолюминесценция|люминесцентные]] [[белки]]: |
|||
Широкое применение находят репортерные гены, кодирующие флюоресцентные и люминесцентные; например, ген медузы, кодирующий [[зеленый флуоресцентный белок]] ({{lang-en|GFP}}), экспрессия которого проявляется в появлении зеленого свечения при освещении синим светом, ген фермента [[люцифераза|люциферазы]], которая катализирует реакцию с люциферином и вызывает свечение, а также ген красного флуоресцентного белка dsRed. Другой ген, часто используемый в качестве репортерного — бактериальный ген [[Lac Z]], кодирующий фермент бета-галактазидазу. Экспрессия данного фермента в бактериальной клетке приводит к появлению синей окраски на среде, содержащей субстрат [[X-gal]]. Ген [[хлорамфеникол]]-ацетилтрансферазы ({{lang-en|CAT}}) обуславливает устойчивость к антибиотику хлорамфениколу и также является репортерным геном. |
|||
* ген [[Медуза|медузы]], кодирующий [[зеленый флуоресцентный белок]] ({{lang-en|GFP}}), экспрессия которого проявляется в появлении зелёного свечения при освещении синим светом; |
|||
* ген [[Ферменты|фермента]] [[люцифераза|люциферазы]], которая [[катализ]]ирует реакцию с [[люциферин]]ом и вызывает свечение; |
|||
== Gene expression assays == |
|||
* ген красного флуоресцентного белка ''[[Красный флуоресцентный белок|DsRed]]''; |
|||
* бактериальный ген ''LacZ'', кодирующий фермент [[бета-галактозидаза|бета-галактозидазу]], экспрессия которого приводит к появлению синей окраски на среде, содержащей субстрат [[X-gal]]; |
|||
Reporter genes can also be used to assay for the expression of the gene of interest, which may produce a protein that has little obvious or immediate effect on the cell culture or organism. In these cases the reporter is directly attached to the gene of interest to create a [[gene fusion]]. The two genes are under the same promoter elements and are [[transcription (genetics)|transcribed]] into a single [[messenger RNA]] molecule. The [[mRNA]] is then translated into protein. In these cases it is important that both proteins be able to properly [[protein folding|fold]] into their active conformations and interact with their substrates despite being fused. In building the DNA construct, a segment of DNA coding for a flexible polypeptide linker region is usually included so that the reporter and the gene product will only minimally interfere with one another. |
|||
* ген [[хлорамфеникол]]-ацетилтрансферазы ({{lang-en|CAT}}) обуславливает устойчивость к антибиотику хлорамфениколу. |
|||
== Promoter assays == |
|||
Reporter genes can be used to assay for the activity of a particular promoter in a cell or organism. In this case there is no separate «gene of interest»; the reporter gene is simply placed under the control of the target promoter and the reporter gene product’s activity is quantitatively measured. The results are normally reported relative to the activity under a «consensus» promoter known to induce strong gene expression. |
|||
== Further uses == |
|||
A more complex usage of reporter genes on a large scale is in [[two-hybrid screening]], which aims to identify proteins that natively interact with one another ''[[in vivo]]''. |
|||
== Ссылки == |
== Ссылки == |
||
* [http://www.reportergene.com Информация о |
* [http://www.reportergene.com Информация о репортёрных генах] |
||
{{mol_bio-stub}} |
{{mol_bio-stub}} |
||
[[Категория:Методы молекулярной биологии]] |
[[Категория:Методы молекулярной биологии]] |
||
[[Категория:Генетика]] |
|||
[[de:Reportergen]] |
|||
[[es:Gen reportero]] |
|||
[[fr:Gène rapporteur]] |
|||
[[he:גן מדווח]] |
|||
[[ja:レポーター遺伝子]] |
|||
[[pl:Gen reporterowy]] |
|||
Текущая версия от 21:40, 5 июня 2023
Репортёрные гены (гены-репортёры, англ. reporter gene) в молекулярной биологии — гены, которые присоединяют к регуляторным последовательностям других генов для исследования проявлений генов в культурах клеток. Некоторые репортёрные гены используются исследователями, так как их экспрессия придаёт организму чётко выраженные легко измеряемые характеристики, некоторые, — так как они являются селективными маркерами. Репортёрные гены используют для того, чтобы определить уровень экспрессии гена в клетке или в популяции. Часто в генно-инженерные конструкции встраивают в качестве репортёра ген LacZ.
Применение
[править | править код]Интересующий исследователя ген и ген-репортёр обычно встраивают в одну генетическую конструкцию, а затем вводят её в клетку или организм. В случае клеток бактерий и эукариот для введения обычно используют кольцевые молекулы ДНК — плазмиды. Важно, чтобы ген-репортёр в норме не экспрессировался в клетке, тогда его экспрессия будет означать, что интересующий ген попал в клетку.
Широкое применение находят репортёрные гены, кодирующие флуоресцентные и люминесцентные белки:
- ген медузы, кодирующий зеленый флуоресцентный белок (англ. GFP), экспрессия которого проявляется в появлении зелёного свечения при освещении синим светом;
- ген фермента люциферазы, которая катализирует реакцию с люциферином и вызывает свечение;
- ген красного флуоресцентного белка DsRed;
- бактериальный ген LacZ, кодирующий фермент бета-галактозидазу, экспрессия которого приводит к появлению синей окраски на среде, содержащей субстрат X-gal;
- ген хлорамфеникол-ацетилтрансферазы (англ. CAT) обуславливает устойчивость к антибиотику хлорамфениколу.
Ссылки
[править | править код] | Это заготовка статьи по молекулярной биологии. Помогите Википедии, дополнив её. |