Электрофорез белков: различия между версиями

Материал из Википедии — свободной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску
Интерактивная навигация по истории
[отпатрулированная версия][отпатрулированная версия]
← Предыдущая правка
Содержимое удалено Содержимое добавлено
ВизуальныйВики-текст
м уточнение
Спасено источников — 12, отмечено мёртвыми — 0. Сообщить об ошибке. См. FAQ.) #IABot (v2.0.9.5
 
(не показаны 24 промежуточные версии 11 участников)
Строка 1: Строка 1:
⚫
{{значения|Электрофорез белков в полиакриламидном геле}}
[[Файл:Coomassie3.jpg|thumb|250px|<small>[[Белки]] [[Дрожжи|дрожжей]], разделённые с помощью [[Электрофорез белков в полиакриламидном геле|электрофореза в полиакриламидном геле]], с применением [[кумасси]] для окрашивания белковых фракций. В первой дорожке слева — белковый маркер [[Молекулярная масса|молекулярной массы]]</small><ref>{{статья|автор=Schägger H., von Jagow G.|заглавие=Tricine-sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis for the separation of proteins in the range from 1 to 100 kDa|ссылка=https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/2449095|язык=en|издание={{en2|Analytical Biochemistry}}|тип=журнал|место=[[Орландо (Флорида)|Orlando, FL]], [[USA]]|издательство=[[Academic Press]]|год=[[1987]]|том=166|номер=2|страницы=368—379|issn=0003-2697|doi=1016/0003-2697(91)90094-A|pmid=2449095}}{{v|27|2|2015}} {{Архивировано|http://www.webcitation.org/6Wes7IYrs|27 февраля 2015}}</ref>]]
[[Файл:Coomassie3.jpg|thumb|250px|{{small|[[Белки]] [[Дрожжи|дрожжей]], разделённые с помощью [[Электрофорез белков в полиакриламидном геле|электрофореза в полиакриламидном геле]], с применением [[кумасси]] для окрашивания белковых фракций. В первой дорожке слева — белковый маркер [[Молекулярная масса|молекулярной массы]]<ref>{{cite pmid|2449095|noedit}}{{v|27|2|2015}} {{Cite web |url=http://molbiol.ru/forums/index.php?act=Attach&type=post&id=92824 |title=Архивированная копия |access-date=2020-10-13 |archive-date=2018-04-06 |archive-url=https://web.archive.org/web/20180406052216/http://molbiol.ru/forums/index.php?act=Attach&type=post&id=92824 |url-status=unfit }}</ref>}}]]
⚫
{{Другие значения|Электрофорез белков в полиакриламидном геле}}
'''Электрофоре́з белко́в''' — способ разделения смеси [[Белки|белков]] на фракции или индивидуальные белки, основанный на движении заряженных белковых [[Макромолекула|макромолекул]] различного [[Молекулярная масса|молекулярного веса]] в [[Постоянный ток|стационарном]] [[Электрическое поле|электрическом поле]]. [[Электрофорез]] белков применяют как для анализа компонентов смеси белков, так и для получения [[Гомогенная система|гомогенного]] белка. Наиболее распространенным вариантом электрофоретического анализа белков является [[электрофорез белков в полиакриламидном геле]] по {{нп5|Лэммли, Ульрих|Лэммли|en|Ulrich K. Laemmli}}<ref name="Laemmli">{{статья|автор={{en2|Ulrich K. Laemmli|Laemmli U. K.}}|заглавие=Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4|ссылка=http://www.nature.com/nature/journal/v227/n5259/abs/227680a0.html|язык=en|издание=[[Nature]]|тип=журнал|место=[[London]], [[Великобритания|UK]]|издательство=[[Nature Publishing Group]]|год=1970|том=227|номер=5259|страницы=680—685|issn=1476-4687|doi=10.1038/227680a0|pmid=5432063}}{{v|27|2|2015}} {{Архивировано|http://www.webcitation.org/6WephQjz0|27 февраля 2015}}</ref><ref name=Osterman>''[[Остерман, Лев Абрамович|Остерман Л. А.]]'' Методы исследования белков и нуклеиновых кислот: электрофорез и ультрацентрифугирование (практическое пособие). — {{М.}}: [[Наука (издательство)|Наука]], 1981. — 288 с.</ref>.
'''Электрофоре́з белко́в''' — способ разделения смеси [[Белки|белков]] на фракции или индивидуальные белки, основанный на движении заряженных белковых [[Макромолекула|макромолекул]] различного [[Молекулярная масса|молекулярного веса]] в [[Постоянный ток|стационарном]] [[Электрическое поле|электрическом поле]]. [[Электрофорез]] белков применяют как для анализа компонентов смеси белков, так и для получения [[Гомогенная система|гомогенного]] белка. Наиболее распространенным вариантом электрофоретического анализа белков является [[электрофорез белков в полиакриламидном геле]] по {{iw|Лэммли, Ульрих|Лэммли||Ulrich K. Laemmli}}<ref name="Laemmli">{{cite pmid|5432063|noedit}}{{v|27|2|2015}}</ref><ref name=Osterman>''[[Остерман, Лев Абрамович|Остерман Л. А.]]'' Методы исследования белков и нуклеиновых кислот: электрофорез и ультрацентрифугирование (практическое пособие). — {{М.}}: [[Наука (издательство)|Наука]], 1981. — 288 с.</ref>.


== Варианты метода электрофореза белков ==
== Варианты метода электрофореза белков ==
Существует множество разновидностей и модификаций данного метода, которые используются (или использовались в определённые периоды развития [[Биохимия|биохимии]] и [[Молекулярная биология|молекулярной биологии]]) в различных областях<ref name=Osterman />:
Существует множество разновидностей и модификаций данного метода, которые используются (или использовались в определённые периоды развития [[Биохимия|биохимии]] и [[Молекулярная биология|молекулярной биологии]]) в различных областях<ref name=Osterman/>:
* Электрофорез в свободных средах (без поддерживающей среды)
* Электрофорез в свободных средах (без поддерживающей среды)
** Электрофорез с подвижной границей
** Электрофорез с подвижной границей
** Зональный электрофорез без поддерживающей среды
** Зональный электрофорез без поддерживающей среды
* Зональный электрофорез в поддерживающей среде с капиллярной структурой
* Зональный электрофорез в поддерживающей среде с капиллярной структурой
** [[Электрофроез белков в крахмальном геле]]<ref name="Smithies55">{{статья|автор=[[Смитис, Оливер|Smithies O.]]|заглавие=Zone electrophoresis in starch gels: group variations in the serum proteins of normal human adults|ссылка=https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1215845/|язык=en|издание={{en2|Biochemical Journal|The Biochemical Journal}}|тип=журнал|место=London, UK|издательство={{en2|Biochemical Society}}; {{en2|Portland Press}}|год=1955|том=61|номер=4|страницы=629—641|issn=0264-6021|pmid=13276348}}{{v|27|2|2015}} {{Архивировано|https://archive.today/7bSkm|27 февраля 2015}}</ref>
** [[Электрофорез белков в крахмальном геле]]<ref name="Smithies55">{{статья|автор=[[Смитис, Оливер|Smithies O.]]|заглавие=Zone electrophoresis in starch gels: group variations in the serum proteins of normal human adults|ссылка=https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1215845/|язык=en|издание={{en2|Biochemical Journal|The Biochemical Journal}}|тип=журнал|место=London, UK|издательство={{en2|Biochemical Society}}; {{en2|Portland Press}}|год=1955|volume=61|номер=4|pages=629—641|issn=0264-6021|pmid=13276348|archiveurl=https://archive.today/20150227171730/https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1215845/|archivedate=2015-02-27}}{{v|27|2|2015}}</ref>
** [[Электрофорез белков в полиакриламидном геле]] (ПААГ)<ref name="Raymond">{{статья|автор=Raymond S., Weintraub L.|заглавие=Acrylamide gel as a supporting medium for zone electrophoresis|ссылка=http://www.sciencemag.org/content/130/3377/711.1.abstract|язык=en|издание=[[Science]]|тип=журнал|место=[[Washington, D.C.]], USA|издательство=[[American Association for the Advancement of Science]]|год=1959|том=130|номер=3377|страницы=711|issn=0036-8075|pmid=14436634}}{{v|27|2|2015}} {{Архивировано|http://www.webcitation.org/6WfHqLade|27 февраля 2015}}</ref>
** [[Электрофорез белков в полиакриламидном геле]] (ПААГ)<ref name="Raymond">{{статья|автор=Raymond S., Weintraub L.|заглавие=Acrylamide gel as a supporting medium for zone electrophoresis|ссылка=https://science.sciencemag.org/content/130/3377/711.1.abstract|язык=en|издание=[[Science]]|тип=журнал|место=[[Washington, D.C.]], USA|издательство=[[American Association for the Advancement of Science]]|год=1959|volume=130|номер=3377|pages=711|issn=0036-8075|pmid=14436634|archivedate=2020-10-18|archiveurl=https://web.archive.org/web/20201018234850/https://science.sciencemag.org/content/130/3377/711.1.abstract}}{{v|27|2|2015}} {{Cite web |url=http://science.sciencemag.org/content/130/3377/711.1 |title=Архивированная копия |access-date=2020-10-13 |archive-date=2017-10-06 |archive-url=https://web.archive.org/web/20171006062228/http://science.sciencemag.org/content/130/3377/711.1 |url-status=unfit }}</ref>
** [[Электрофорез белков в агарозном геле]]
** [[Электрофорез белков в агарозном геле]]
** Электрофорез на фильтровальной бумаге
** Электрофорез на фильтровальной бумаге
Строка 17: Строка 17:
* [[Капиллярный электрофорез]]
* [[Капиллярный электрофорез]]


Электрофорез белков подразделяется также на одномерный и двумерный (2D) электрофорез<ref name="2D">{{статья|автор={{en2|Patrick H. O'Farrell|O'Farrell P. H.}}|заглавие=High resolution two-dimensional electrophoresis of proteins|ссылка=http://www.jbc.org/content/250/10/4007.long|язык=en|издание=The Journal of Biological Chemistry|тип=журнал|место=[[Балтимор|Baltimore, MD]], USA|издательство={{en2|American Society for Biochemistry and Molecular Biology}}|год=1975|том=250|номер=10|страницы=4007—4021|issn=4406-4412|pmid=236308}}{{v|27|2|2015}} {{Архивировано|http://www.webcitation.org/6WfKzGhYn|27 февраля 2015}}</ref>, препаративный и аналитический, а также электрофорез {{нп5|Нативная конформация|нативных белков|en|Native state}} и электрофорез в присутствии [[детергент]]а (в [[Денатурация белков|денатурирующих]] условиях). Разновидностью метода электрофореза являются [[изоэлектрическое фокусирование]] и [[изотахофорез]]. В случае использования иммунологических методов для выявления разделённых белков говорят про [[иммуноэлектрофорез]].
Электрофорез белков подразделяется также на одномерный и двумерный (2D) электрофорез<ref name="2D">{{статья|автор={{en2|Patrick H. O'Farrell|O'Farrell P. H.}}|заглавие=High resolution two-dimensional electrophoresis of proteins|ссылка=https://www.jbc.org/content/250/10/4007.long|язык=en|издание=The Journal of Biological Chemistry|тип=журнал|место=[[Балтимор|Baltimore, MD]], USA|издательство={{en2|American Society for Biochemistry and Molecular Biology}}|год=1975|volume=250|номер=10|pages=4007—4021|issn=4406-4412|pmid=236308|archivedate=2020-01-18|archiveurl=https://web.archive.org/web/20200118164617/http://www.jbc.org/content/250/10/4007.long}}{{v|27|2|2015}} {{Cite web |url=http://www.jbc.org/content/250/10/4007.long |title=Архивированная копия |access-date=2015-02-27 |archive-date=2020-01-18 |archive-url=https://web.archive.org/web/20200118164617/http://www.jbc.org/content/250/10/4007.long |url-status=unfit }}</ref>, препаративный и аналитический, а также электрофорез {{iw|Нативная конформация|нативных белков||Native state}} и электрофорез в присутствии [[детергент]]а (в [[Денатурация белков|денатурирующих]] условиях). Разновидностью метода электрофореза являются [[изоэлектрическое фокусирование]] и [[изотахофорез]]. В случае использования иммунологических методов для выявления разделённых белков говорят про [[иммуноэлектрофорез]].


В зависимости от конструкции электрофоретического [[аппарат]]а различают горизонтальный и вертикальный электрофорез белков.
В зависимости от конструкции электрофоретического {{d-l|Аппарат|аппарата}} различают горизонтальный и вертикальный электрофорез белков.


== История и области применения ==
== История и области применения ==
После первых экспериментов с электрофорезом, проводившихся в нескольких лабораториях в [[1930-е]] — [[1940-е годы]], в том числе пионером электрофореза — [[Нобелевский лауреат|нобелевским лауреатом]] [[Тиселиус, Арне|Арне Тиселиусом]]<ref>{{статья|автор=[[Тиселиус, Арне|Tiselius A.]]|заглавие=A new apparatus for electrophoretic analysis of colloidal mixtures|ссылка=http://pubs.rsc.org/en/Content/ArticleLanding/1937/TF/tf9373300524#!divAbstract|язык=en|издание={{en2|Transactions of the Faraday Society}}|тип=журнал|место=London, UK|издательство={{en2|Faraday Society}}|год=[[1937]]|том=33|страницы=524—531|issn=0014-7672|doi=10.1039/TF9373300524}}{{v|28|2|2015}} {{Архивировано|http://www.webcitation.org/6WgJG1fbs|28 февраля 2015}}</ref>, существенный прогресс в дальнейшем развитии и применении этого метода для разделения белков начался в [[1955 год]]у с разработки зонального электрофореза в [[крахмал]]ьном [[Гели|геле]], которую осуществил [[Смитис, Оливер|Оливер Смитис]], впоследствии также нобелевский лауреат<ref name="Smithies55" /><ref>{{книга|заглавие=Electrophoresis: Theory, Methods and Applications|ссылка=https://www.worldcat.org/title/electrophoresis-theory-methods-and-applications/oclc/749221661?referer=di&ht=edition|ответственный=Ed. by M. Bier|издание=3rd printing edn|место=[[Нью-Йорк|New York, NY]], USA|издательство=Academic Press|год=[[1964]]|pages=225|allpages=563}}{{ref-en}}{{v|27|2|2015}} {{Архивировано|http://www.webcitation.org/6WexH7rX7|27 февраля 2015}}</ref>. Метод совершенствовался<ref name="Smithies59">{{статья|автор=Smithies O.|заглавие=An improved procedure for starch-gel electrophoresis: further variations in the serum proteins of normal individuals|ссылка=http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1196836/|язык=en|издание=The Biochemical Journal|тип=журнал|место=London, UK|издательство=Biochemical Society; Portland Press|год=1959|том=71|номер=3|страницы=585—587|issn=0264-6021|pmid=13638269}}{{v|27|2|2015}} {{Архивировано|https://archive.today/d2WZn|27 февраля 2015}}</ref><ref name="Gahne">{{статья|автор=Gahne B.|заглавие=Studies on the inheritance of electrophoretic forms of transferrins, albumins, prealbumins and plasma esterases of horses|ссылка=http://www.genetics.org/content/53/4/681.long|язык=en|издание={{en2|Genetics (journal)|Genetics}}|тип=журнал|место=Baltimore, MD, USA|издательство={{en2|Genetics Society of America}}|год=[[1966]]|том=53|номер=4|страницы=681—694|issn=0016-6731|pmid=5960258}}{{v|27|2|2015}} {{Архивировано|http://www.webcitation.org/6WeyLie0W|27 февраля 2015}}</ref> и получил большое распространение в экспериментальной биохимии и молекулярной биологии.
После первых экспериментов с электрофорезом, проводившихся в нескольких лабораториях в 1930-е — 1940-е годы, в том числе пионером электрофореза — [[Нобелевский лауреат|нобелевским лауреатом]] [[Тиселиус, Арне|Арне Тиселиусом]]<ref>{{статья|автор=[[Тиселиус, Арне|Tiselius A.]]|заглавие=A new apparatus for electrophoretic analysis of colloidal mixtures|ссылка=https://pubs.rsc.org/en/Content/ArticleLanding/1937/TF/tf9373300524#!divAbstract|язык=en|издание={{en2|Transactions of the Faraday Society}}|тип=журнал|место=London, UK|издательство={{en2|Faraday Society}}|год=1937|volume=33|pages=524—531|issn=0014-7672|doi=10.1039/TF9373300524|archivedate=2020-08-10|archiveurl=https://web.archive.org/web/20200810200249/https://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/1937/tf/tf9373300524#!divAbstract}}{{v|28|2|2015}} {{Cite web |url=https://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/1937/tf/tf9373300524 |title=Архивированная копия |access-date=2020-10-13 |archive-date=2020-08-10 |archive-url=https://web.archive.org/web/20200810200249/https://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/1937/tf/tf9373300524 |url-status=unfit }}</ref>, существенный прогресс в дальнейшем развитии и применении этого метода для разделения белков начался в 1955 году с разработки зонального электрофореза в [[крахмал]]ьном [[Гели|геле]], которую осуществил [[Смитис, Оливер|Оливер Смитис]], впоследствии также нобелевский лауреат<ref name="Smithies55"/><ref>{{книга|заглавие=Electrophoresis: Theory, Methods and Applications|ссылка=https://www.worldcat.org/title/electrophoresis-theory-methods-and-applications/oclc/749221661?referer=di&ht=edition|ответственный=Ed. by M. Bier|издание=3rd printing edn|место=[[Нью-Йорк|New York, NY]], USA|издательство=Academic Press|год=1964|pages=225|allpages=563|archive-date=2017-10-05|archive-url=https://web.archive.org/web/20171005203127/https://www.worldcat.org/title/electrophoresis-theory-methods-and-applications/oclc/749221661?referer=di&ht=edition}}{{ref-en}}{{v|27|2|2015}} {{Cite web |url=https://www.worldcat.org/title/electrophoresis-theory-methods-and-applications/oclc/749221661?referer=di&ht=edition |title=Архивированная копия |access-date=2015-02-27 |archive-date=2017-10-05 |archive-url=https://web.archive.org/web/20171005203127/https://www.worldcat.org/title/electrophoresis-theory-methods-and-applications/oclc/749221661?referer=di&ht=edition |url-status=unfit }}</ref>. Метод совершенствовался<ref name="Smithies59">{{статья|автор=Smithies O.|заглавие=An improved procedure for starch-gel electrophoresis: further variations in the serum proteins of normal individuals|ссылка=https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1196836/|язык=en|издание=The Biochemical Journal|тип=журнал|место=London, UK|издательство=Biochemical Society; Portland Press|год=1959|volume=71|номер=3|pages=585—587|issn=0264-6021|pmid=13638269|archiveurl=https://archive.today/20150227174043/http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1196836/|archivedate=2015-02-27}}{{v|27|2|2015}}</ref><ref name="Gahne">{{статья|автор=Gahne B.|заглавие=Studies on the inheritance of electrophoretic forms of transferrins, albumins, prealbumins and plasma esterases of horses|ссылка=https://www.genetics.org/content/53/4/681.long|язык=en|издание={{en2|Genetics (journal)|Genetics}}|тип=журнал|место=Baltimore, MD, USA|издательство={{en2|Genetics Society of America}}|год=1966|volume=53|номер=4|pages=681—694|issn=0016-6731|pmid=5960258|archivedate=2017-10-05|archiveurl=https://web.archive.org/web/20171005202537/http://www.genetics.org/content/53/4/681.long}}{{v|27|2|2015}} {{Cite web |url=http://www.genetics.org/content/53/4/681.long |title=Архивированная копия |access-date=2015-02-27 |archive-date=2017-10-05 |archive-url=https://web.archive.org/web/20171005202537/http://www.genetics.org/content/53/4/681.long |url-status=unfit }}</ref> и получил большое распространение в экспериментальной биохимии и молекулярной биологии.


В [[1959 год]]у был предложен метод электрофореза белков в ПААГ<ref name="Raymond" />, в [[1962 год]]у — метод [[диск-электрофорез]]а<ref>''Ornstein L., Davis B. J.'' Disc Electrophoresis. — {{en2|Рочестер (Нью-Йорк)|Rochester, NY}}, USA: Distillation Products Industries, [[Eastman Kodak|Eastman Kodak Co.]], 1962.{{ref-en}}</ref>, в [[1969 год]]у — применение денатурирующих агентов ([[Лаурилсульфат натрия|SDS]])<ref>{{статья|автор=Weber K., Osborn M.|заглавие=The reliability of molecular weight determinations by dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis|ссылка=http://www.jbc.org/content/244/16/4406.long|язык=en|издание=The Journal of Biological Chemistry|тип=журнал|место=Baltimore, MD, USA|издательство=American Society for Biochemistry and Molecular Biology|год=1969|том=244|номер=16|страницы=4406-4412|issn=0021-9258|pmid=5806584}}{{v|27|2|2015}} {{Архивировано|http://www.webcitation.org/6WfJiGnnC|27 февраля 2015}}</ref>. В [[1970 год]]у Лэммли значительно усовершенствовал электрофорез в ПААГ, разделив 28 белковых компонентов [[Фаг Т4|бактериофага T4]]<ref name="Laemmli" />. В [[1975 год]]у появился двумерный (2D) электрофорез<ref name="2D" />.
В 1959 году был предложен метод электрофореза белков в ПААГ<ref name="Raymond"/>, в 1962 году — метод [[диск-электрофорез]]а<ref>''Ornstein L., Davis B. J.'' Disc Electrophoresis. — {{en2|Рочестер (Нью-Йорк)|Rochester, NY}}, USA: Distillation Products Industries, [[Eastman Kodak|Eastman Kodak Co.]], 1962.{{ref-en}}</ref>, в 1969 году — применение денатурирующих агентов ([[Лаурилсульфат натрия|SDS]])<ref>{{статья|автор=Weber K., Osborn M.|заглавие=The reliability of molecular weight determinations by dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis|ссылка=https://www.jbc.org/content/244/16/4406.long|язык=en|издание=The Journal of Biological Chemistry|тип=журнал|место=Baltimore, MD, USA|издательство=American Society for Biochemistry and Molecular Biology|год=1969|volume=244|номер=16|pages=4406—4412|issn=0021-9258|pmid=5806584|archivedate=2019-05-12|archiveurl=https://web.archive.org/web/20190512064225/http://www.jbc.org/content/244/16/4406.long}}{{v|27|2|2015}} {{Cite web |url=https://www.jbc.org/content/244/16/4406.long |title=Архивированная копия |access-date=2020-10-13 |archive-date=2020-01-18 |archive-url=https://web.archive.org/web/20200118093200/https://www.jbc.org/content/244/16/4406.long |url-status=unfit }}</ref>. В 1970 году Лэммли значительно усовершенствовал электрофорез в ПААГ, разделив 28 белковых компонентов [[Фаг Т4|бактериофага T4]]<ref name="Laemmli"/>. В 1975 году появился двумерный (2D) электрофорез<ref name="2D"/>.


Электрофорез белков нашёл широкое применение в биологических исследованиях, как фундаментальных<ref name="Laemmli" /><ref name="Smithies55" /><ref>''Hunter R. L., Merkert C. L.'' Histochemical demonstration of enzymes separated by zone electrophoresis in starch gels // Science. — [[1957]]. — Vol. 125. — P. 1294—1295.{{ref-en}}</ref>, так и прикладных<ref>{{статья|автор=Baker C. M. A.|заглавие=Molecular genetics of avian proteins. IX. Interspecific and intraspecific variation of egg white proteins of the genus Gallus|ссылка=http://www.genetics.org/content/58/2/211.long|язык=en|издание=Genetics|тип=журнал|место=Baltimore, MD, USA|издательство=Genetics Society of America|год=1968|том=58|номер=2|страницы=211—226|issn=0016-6731|pmid=5960258}}{{v|27|2|2015}} {{Архивировано|http://www.webcitation.org/6Wez0uOJo|27 февраля 2015}}</ref><ref>{{статья|автор=Baker C. M. A., Croizier G., Stratil A., Manwell C.|заглавие=Identity and nomenclature of some protein polymorphisms of chicken eggs and sera|ссылка=http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/4936422|язык=en|издание=Advances in Genetics|тип=журнал|место=New York, NY, USA|издательство=Academic Press|год=1970|том=15|страницы=147—174|issn=0065-2660|pmid=4936422}}{{v|27|2|2015}} {{Архивировано|http://www.webcitation.org/6WezYMIq0|27 февраля 2015}}</ref><ref>{{cite conference|first=M. N.|last=Romanov|date=1988-06-07|title=Study of genetic polymorphism of ovoproteins in some egg type and meat-egg type lines of chickens|conference=4th Symposium of Young Poultry Scientists|booktitle=Abstracts|publisher=World's Poultry Science Association, Polish Branch|location=[[Kraków]], [[Poland]]|pages=10|url=http://kar.kent.ac.uk/46291/|accessdate=2015-02-28|oclc=899128291}}{{ref-en}} {{Архивировано|http://www.webcitation.org/6WgHhmQeR|28 февраля 2015}}</ref><ref>{{cite conference|first=М. Н.|last=Романов|date=1994-01-27|title=Электрофоретическое изучение овопротеиновых локусов в популяциях яичных кур в процессе совершенствования кросса «Хайсекс коричневый»|conference=I Междунар. конф. по молекулярно-генетическим маркерам животных|booktitle=Тез. докл.|publisher=[[Национальная академия аграрных наук Украины|Укр. акад. аграр. наук]], Ин-т разведения и генетики животных, Ин-т агроэкологии и биотехнологии; Аграрна наука|location=[[Киев]], [[Украина]]|pages=34—35|url=http://kar.kent.ac.uk/46418/|accessdate=2015-02-28|id=[http://www.cnshb.ru/ ЦНСХБ], TRN: RU9815007X|oclc=899128337}} {{Архивировано|https://archive.today/3YuZx|28 февраля 2015}}</ref><ref>{{cite conference|first=М. Н.|last=Романов|coauthors=Черников В. Ф.|date=1994-01-27|title=Полиморфные овобелки как маркеры внутрипопуляционной изменчивости озерной чайки|conference=I Междунар. конф. по молекулярно-генетическим маркерам животных|booktitle=Тез. докл.|publisher=Укр. акад. аграр. наук, Ин-т разведения и генетики животных, Ин-т агроэкологии и биотехнологии; Аграрна наука|location=Киев, Украина|pages=35—36|url=http://kar.kent.ac.uk/46307/|accessdate=2015-02-28|oclc=899128260}} {{Архивировано|http://www.webcitation.org/6WgHFDsxQ|28 февраля 2015}}</ref>. Ряд вариантов метода используется и поныне; например, 2D-электрофорез является в [[Протеомика|протеомике]] одним из методов изучения [[протеом]]а<ref>{{статья|автор=Komatsu S., Kojima K., Suzuki K., Ozaki K., Higo K.|заглавие=Rice Proteome Database based on two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis: its status in 2003|ссылка=http://nar.oxfordjournals.org/content/32/suppl_1/D388.long|язык=en|издание={{en2|Nucleic Acids Research}}|тип=журнал|место=[[Oxford]], UK|издательство=[[Oxford University Press]]|год=[[2004]]|том=32|выпуск=Database issue|страницы=D388—D392|issn=0305-1048|pmid=14681440}}{{v|28|2|2015}} {{Архивировано|http://www.webcitation.org/6WgKuyY79|28 февраля 2015}}</ref>.
Электрофорез белков нашёл широкое применение в биологических исследованиях, как фундаментальных<ref name="Laemmli"/><ref name="Smithies55"/><ref>''Hunter R. L., Merkert C. L.'' Histochemical demonstration of enzymes separated by zone electrophoresis in starch gels // Science. — 1957. — Vol. 125. — P. 1294—1295.{{ref-en}}</ref>, так и прикладных<ref>{{статья|автор=Baker C. M. A.|заглавие=Molecular genetics of avian proteins. IX. Interspecific and intraspecific variation of egg white proteins of the genus Gallus|ссылка=https://www.genetics.org/content/58/2/211.long|язык=en|издание=Genetics|тип=журнал|место=Baltimore, MD, USA|издательство=Genetics Society of America|год=1968|volume=58|номер=2|pages=211—226|issn=0016-6731|pmid=5960258|archivedate=2020-10-15|archiveurl=https://web.archive.org/web/20201015065920/https://www.genetics.org/content/58/2/211.long}}{{v|27|2|2015}} {{Cite web |url=http://www.genetics.org/content/58/2/211.long |title=Архивированная копия |access-date=2015-02-27 |archive-date=2017-10-06 |archive-url=https://web.archive.org/web/20171006011721/http://www.genetics.org/content/58/2/211.long |url-status=unfit }}</ref><ref>{{статья|автор=Baker C. M. A., Croizier G., Stratil A., Manwell C.|заглавие=Identity and nomenclature of some protein polymorphisms of chicken eggs and sera|ссылка=https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/4936422/|язык=en|издание=Advances in Genetics|тип=журнал|место=New York, NY, USA|издательство=Academic Press|год=1970|volume=15|pages=147—174|issn=0065-2660|pmid=4936422|archivedate=2020-10-13|archiveurl=https://web.archive.org/web/20201013194846/https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/4936422/}}{{v|27|2|2015}} {{Cite web |url=https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/4936422/ |title=Архивированная копия |access-date=2020-10-13 |archive-date=2020-10-13 |archive-url=https://web.archive.org/web/20201013194846/https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/4936422/ |url-status=unfit }}</ref><ref>{{cite conference|last=Romanov M. N.|date=1988-06-07|title=Study of genetic polymorphism of ovoproteins in some egg type and meat-egg type lines of chickens|conference=4th Symposium of Young Poultry Scientists|book-title=Abstracts|publisher=World's Poultry Science Association, Polish Branch|location=[[Kraków]], [[Poland]]|pages=10|url=https://kar.kent.ac.uk/46291/|accessdate=2020-10-18|oclc=899128291|archive-date=2017-10-06|archive-url=https://web.archive.org/web/20171006012534/https://kar.kent.ac.uk/46291/|url-status=live}}{{ref-en}}</ref><ref>{{cite conference|last=Романов М. Н.|date=1994-01-27|title=Электрофоретическое изучение овопротеиновых локусов в популяциях яичных кур в процессе совершенствования кросса «Хайсекс коричневый»|conference=I Междунар. конф. по молекулярно-генетическим маркерам животных, [[Киев]], 27—29 января 1994|book-title=Тез. докл.|publisher=[[Национальная академия аграрных наук Украины|Укр. акад. аграр. наук]], Ин-т разведения и генетики животных, Ин-т агроэкологии и биотехнологии; Аграрна наука|location=Киев, [[Украина]]|pages=34—35|url=https://kar.kent.ac.uk/46418/|accessdate=2015-02-28|id=[http://www.cnshb.ru/ ЦНСХБ], TRN: RU9815007X|oclc=899128337|archive-date=2017-10-06|archive-url=https://web.archive.org/web/20171006013258/https://kar.kent.ac.uk/46418/|url-status=dead}}</ref><ref>{{cite conference|last=Романов М. Н.|coauthors=Черников В. Ф.|date=1994-01-27|title=Полиморфные овобелки как маркеры внутрипопуляционной изменчивости озёрной чайки|conference=I Междунар. конф. по молекулярно-генетическим маркерам животных, Киев, 27—29 января 1994|book-title=Тез. докл.|publisher=Укр. акад. аграр. наук, Ин-т разведения и генетики животных, Ин-т агроэкологии и биотехнологии; Аграрна наука|location=Киев, Украина|pages=35—36|url=https://kar.kent.ac.uk/46307/|accessdate=2015-02-28|oclc=899128260|archive-date=2020-08-08|archive-url=https://web.archive.org/web/20200808160347/https://kar.kent.ac.uk/46307/|url-status=dead}}</ref>. Ряд вариантов метода используется и поныне; например, 2D-электрофорез является в [[Протеомика|протеомике]] одним из методов изучения [[протеом]]а<ref>{{статья|автор=Komatsu S., Kojima K., Suzuki K., Ozaki K., Higo K.|заглавие=Rice Proteome Database based on two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis: its status in 2003|ссылка=https://academic.oup.com/nar/article/32/suppl_1/D388/2505168|язык=en|издание={{en2|Nucleic Acids Research}}|тип=журнал|место=[[Oxford]], UK|издательство=[[Oxford University Press]]|год=2004|volume=32|номер=Database issue|pages=D388—D392|issn=0305-1048|pmid=14681440|archivedate=2018-06-03|archiveurl=https://web.archive.org/web/20180603112324/https://academic.oup.com/nar/article/32/suppl_1/D388/2505168}}{{v|28|2|2015}} {{Cite web |url=https://academic.oup.com/nar/article/32/suppl_1/D388/2505168 |title=Архивированная копия |access-date=2020-10-13 |archive-date=2018-06-03 |archive-url=https://web.archive.org/web/20180603112324/https://academic.oup.com/nar/article/32/suppl_1/D388/2505168 |url-status=unfit }}</ref>.


== См. также ==
== См. также ==
Строка 35: Строка 35:


== Примечания ==
== Примечания ==
{{примечания|2}}
{{примечания}}


== Литература ==
== Литература ==
Строка 41: Строка 41:


== Ссылки ==
== Ссылки ==
{{Родственные проекты
⚫
* {{cite web|url=http://www.adfg.alaska.gov/index.cfm?adfg=fishinggeneconservationlab.electrophoresis|title=Allozyme Electrophoresis Techniques|work=Fishing: Research: Gene Conservation Lab|publisher=Division of Commercial Fisheries, {{en2|Alaska Department of Fish and Game}}, [[Аляска|State of Alaska]]|description=Пособие по электрофорезу в крахмальном геле|lang=en|accessdate=2015-02-27|archiveurl=http://www.webcitation.org/6Wet1KEyN|archivedate=2015-02-27}}
| Викисловарь = электрофорез
}}
⚫
* {{cw|url=http://www.adfg.alaska.gov/index.cfm?adfg=fishinggeneconservationlab.electrophoresis|title=Allozyme Electrophoresis Techniques|work=Fishing: Research: Gene Conservation Lab|publisher=Division of Commercial Fisheries, {{en2|Alaska Department of Fish and Game}}, [[Аляска|State of Alaska]]|description=Пособие по электрофорезу в крахмальном геле|lang=en|accessdate=2015-02-27|archiveurl=https://web.archive.org/web/20150227192116/http://www.adfg.alaska.gov/index.cfm?adfg=fishinggeneconservationlab.electrophoresis|archivedate=2015-02-27|url-status=dead}}


{{Внешние ссылки}}
⚫
[[Категория:Белки]]
⚫
[[Категория:Методы биологических исследований]]


⚫
[[Категория:Белки]]
[[en:Protein electrophoresis]]
⚫
[[Категория:Методы молекулярной биологии]]

Текущая версия от 09:10, 6 января 2024

У этого термина существуют и другие значения, см. Электрофорез белков в полиакриламидном геле.
Белки дрожжей, разделённые с помощью электрофореза в полиакриламидном геле, с применением кумасси для окрашивания белковых фракций. В первой дорожке слева — белковый маркер молекулярной массы[1]

Электрофоре́з белко́в — способ разделения смеси белков на фракции или индивидуальные белки, основанный на движении заряженных белковых макромолекул различного молекулярного веса в стационарном электрическом поле. Электрофорез белков применяют как для анализа компонентов смеси белков, так и для получения гомогенного белка. Наиболее распространенным вариантом электрофоретического анализа белков является электрофорез белков в полиакриламидном геле по Лэммли[англ.][2][3].

Варианты метода электрофореза белков

[править | править код]

Существует множество разновидностей и модификаций данного метода, которые используются (или использовались в определённые периоды развития биохимии и молекулярной биологии) в различных областях[3]:

Электрофорез белков подразделяется также на одномерный и двумерный (2D) электрофорез[6], препаративный и аналитический, а также электрофорез нативных белков[англ.] и электрофорез в присутствии детергента (в денатурирующих условиях). Разновидностью метода электрофореза являются изоэлектрическое фокусирование и изотахофорез. В случае использования иммунологических методов для выявления разделённых белков говорят про иммуноэлектрофорез.

В зависимости от конструкции электрофоретического аппарата различают горизонтальный и вертикальный электрофорез белков.

История и области применения

[править | править код]

После первых экспериментов с электрофорезом, проводившихся в нескольких лабораториях в 1930-е — 1940-е годы, в том числе пионером электрофореза — нобелевским лауреатом Арне Тиселиусом[7], существенный прогресс в дальнейшем развитии и применении этого метода для разделения белков начался в 1955 году с разработки зонального электрофореза в крахмальном геле, которую осуществил Оливер Смитис, впоследствии также нобелевский лауреат[4][8]. Метод совершенствовался[9][10] и получил большое распространение в экспериментальной биохимии и молекулярной биологии.

В 1959 году был предложен метод электрофореза белков в ПААГ[5], в 1962 году — метод диск-электрофореза[11], в 1969 году — применение денатурирующих агентов (SDS)[12]. В 1970 году Лэммли значительно усовершенствовал электрофорез в ПААГ, разделив 28 белковых компонентов бактериофага T4[2]. В 1975 году появился двумерный (2D) электрофорез[6].

Электрофорез белков нашёл широкое применение в биологических исследованиях, как фундаментальных[2][4][13], так и прикладных[14][15][16][17][18]. Ряд вариантов метода используется и поныне; например, 2D-электрофорез является в протеомике одним из методов изучения протеома[19].

См. также

[править | править код]

Примечания

[править | править код]
  1. ↑ Schägger H., von Jagow G. Tricine-sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis for the separation of proteins in the range from 1 to 100 kDa (англ.) // Analytical Biochemistry[англ.] : журнал. — Orlando, FL, USA: Academic Press, 1987. — Vol. 166, no. 2. — P. 368—379. — ISSN 0003-2697. — PMID 2449095. (Дата обращения: 27 февраля 2015) Архивированная копия. Дата обращения: 13 октября 2020. Архивировано 6 апреля 2018 года.
  2. ↑ 1 2 3 Laemmli U. K.[англ.]. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 (англ.) // Nature : журнал. — London, UK: Nature Publishing Group, 1970. — Vol. 227, no. 5259. — P. 680—685. — ISSN 1476-4687. — doi:10.1038/227680a0. — PMID 5432063. Архивировано 27 февраля 2015 года. (Дата обращения: 27 февраля 2015)
  3. ↑ 1 2 Остерман Л. А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот: электрофорез и ультрацентрифугирование (практическое пособие). — М.: Наука, 1981. — 288 с.
  4. ↑ 1 2 3 Smithies O. Zone electrophoresis in starch gels: group variations in the serum proteins of normal human adults (англ.) // The Biochemical Journal : журнал. — London, UK: Biochemical Society; Portland Press, 1955. — Vol. 61, no. 4. — P. 629—641. — ISSN 0264-6021. — PMID 13276348. Архивировано 27 февраля 2015 года. (Дата обращения: 27 февраля 2015)
  5. ↑ 1 2 Raymond S., Weintraub L. Acrylamide gel as a supporting medium for zone electrophoresis (англ.) // Science : журнал. — Washington, D.C., USA: American Association for the Advancement of Science, 1959. — Vol. 130, no. 3377. — P. 711. — ISSN 0036-8075. — PMID 14436634. Архивировано 18 октября 2020 года. (Дата обращения: 27 февраля 2015) Архивированная копия. Дата обращения: 13 октября 2020. Архивировано 6 октября 2017 года.
  6. ↑ 1 2 O'Farrell P. H. High resolution two-dimensional electrophoresis of proteins (англ.) // The Journal of Biological Chemistry : журнал. — Baltimore, MD, USA: American Society for Biochemistry and Molecular Biology, 1975. — Vol. 250, no. 10. — P. 4007—4021. — ISSN 4406-4412. — PMID 236308. Архивировано 18 января 2020 года. (Дата обращения: 27 февраля 2015) Архивированная копия. Дата обращения: 27 февраля 2015. Архивировано 18 января 2020 года.
  7. ↑ Tiselius A. A new apparatus for electrophoretic analysis of colloidal mixtures (англ.) // Transactions of the Faraday Society : журнал. — London, UK: Faraday Society, 1937. — Vol. 33. — P. 524—531. — ISSN 0014-7672. — doi:10.1039/TF9373300524. Архивировано 10 августа 2020 года. (Дата обращения: 28 февраля 2015) Архивированная копия. Дата обращения: 13 октября 2020. Архивировано 10 августа 2020 года.
  8. ↑ Electrophoresis: Theory, Methods and Applications / Ed. by M. Bier. — 3rd printing edn. — New York, NY, USA: Academic Press, 1964. — P. 225. — 563 p. Архивировано 5 октября 2017 года. (англ.) (Дата обращения: 27 февраля 2015) Архивированная копия. Дата обращения: 27 февраля 2015. Архивировано 5 октября 2017 года.
  9. ↑ Smithies O. An improved procedure for starch-gel electrophoresis: further variations in the serum proteins of normal individuals (англ.) // The Biochemical Journal : журнал. — London, UK: Biochemical Society; Portland Press, 1959. — Vol. 71, no. 3. — P. 585—587. — ISSN 0264-6021. — PMID 13638269. Архивировано 27 февраля 2015 года. (Дата обращения: 27 февраля 2015)
  10. ↑ Gahne B. Studies on the inheritance of electrophoretic forms of transferrins, albumins, prealbumins and plasma esterases of horses (англ.) // Genetics : журнал. — Baltimore, MD, USA: Genetics Society of America, 1966. — Vol. 53, no. 4. — P. 681—694. — ISSN 0016-6731. — PMID 5960258. Архивировано 5 октября 2017 года. (Дата обращения: 27 февраля 2015) Архивированная копия. Дата обращения: 27 февраля 2015. Архивировано 5 октября 2017 года.
  11. ↑ Ornstein L., Davis B. J. Disc Electrophoresis. — Rochester, NY, USA: Distillation Products Industries, Eastman Kodak Co., 1962. (англ.)
  12. ↑ Weber K., Osborn M. The reliability of molecular weight determinations by dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (англ.) // The Journal of Biological Chemistry : журнал. — Baltimore, MD, USA: American Society for Biochemistry and Molecular Biology, 1969. — Vol. 244, no. 16. — P. 4406—4412. — ISSN 0021-9258. — PMID 5806584. Архивировано 12 мая 2019 года. (Дата обращения: 27 февраля 2015) Архивированная копия. Дата обращения: 13 октября 2020. Архивировано 18 января 2020 года.
  13. ↑ Hunter R. L., Merkert C. L. Histochemical demonstration of enzymes separated by zone electrophoresis in starch gels // Science. — 1957. — Vol. 125. — P. 1294—1295. (англ.)
  14. ↑ Baker C. M. A. Molecular genetics of avian proteins. IX. Interspecific and intraspecific variation of egg white proteins of the genus Gallus (англ.) // Genetics : журнал. — Baltimore, MD, USA: Genetics Society of America, 1968. — Vol. 58, no. 2. — P. 211—226. — ISSN 0016-6731. — PMID 5960258. Архивировано 15 октября 2020 года. (Дата обращения: 27 февраля 2015) Архивированная копия. Дата обращения: 27 февраля 2015. Архивировано 6 октября 2017 года.
  15. ↑ Baker C. M. A., Croizier G., Stratil A., Manwell C. Identity and nomenclature of some protein polymorphisms of chicken eggs and sera (англ.) // Advances in Genetics : журнал. — New York, NY, USA: Academic Press, 1970. — Vol. 15. — P. 147—174. — ISSN 0065-2660. — PMID 4936422. Архивировано 13 октября 2020 года. (Дата обращения: 27 февраля 2015) Архивированная копия. Дата обращения: 13 октября 2020. Архивировано 13 октября 2020 года.
  16. ↑ Romanov M. N. (1988-06-07). "Study of genetic polymorphism of ovoproteins in some egg type and meat-egg type lines of chickens". Abstracts. 4th Symposium of Young Poultry Scientists. Kraków, Poland: World's Poultry Science Association, Polish Branch. p. 10. OCLC 899128291. Архивировано 6 октября 2017. Дата обращения: 18 октября 2020. (англ.)
  17. ↑ Романов М. Н. (1994-01-27). "Электрофоретическое изучение овопротеиновых локусов в популяциях яичных кур в процессе совершенствования кросса «Хайсекс коричневый»". Тез. докл. I Междунар. конф. по молекулярно-генетическим маркерам животных, Киев, 27—29 января 1994. Киев, Украина: Укр. акад. аграр. наук, Ин-т разведения и генетики животных, Ин-т агроэкологии и биотехнологии; Аграрна наука. pp. 34—35. OCLC 899128337. ЦНСХБ, TRN: RU9815007X. Архивировано из оригинала 6 октября 2017. Дата обращения: 28 февраля 2015.
  18. ↑ Романов М. Н. (1994-01-27). "Полиморфные овобелки как маркеры внутрипопуляционной изменчивости озёрной чайки". Тез. докл. I Междунар. конф. по молекулярно-генетическим маркерам животных, Киев, 27—29 января 1994. Киев, Украина: Укр. акад. аграр. наук, Ин-т разведения и генетики животных, Ин-т агроэкологии и биотехнологии; Аграрна наука. pp. 35—36. OCLC 899128260. Архивировано из оригинала 8 августа 2020. Дата обращения: 28 февраля 2015. {{cite conference}}: Неизвестный параметр |coauthors= игнорируется (|author= предлагается) (справка)
  19. ↑ Komatsu S., Kojima K., Suzuki K., Ozaki K., Higo K. Rice Proteome Database based on two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis: its status in 2003 (англ.) // Nucleic Acids Research : журнал. — Oxford, UK: Oxford University Press, 2004. — Vol. 32, no. Database issue. — P. D388—D392. — ISSN 0305-1048. — PMID 14681440. Архивировано 3 июня 2018 года. (Дата обращения: 28 февраля 2015) Архивированная копия. Дата обращения: 13 октября 2020. Архивировано 3 июня 2018 года.

Литература

[править | править код]
  • Vesterberg O. History of electrophoretic methods // Journal of Chromatography. — 1989. — Vol. 480. — P. 3—19. (англ.)

Ссылки

[править | править код]
  • Allozyme Electrophoresis Techniques (англ.). Fishing: Research: Gene Conservation Lab. Division of Commercial Fisheries, Alaska Department of Fish and Game, State of Alaska. — Пособие по электрофорезу в крахмальном геле. Дата обращения: 27 февраля 2015. Архивировано из оригинала 27 февраля 2015 года.
Источник — https://ru.wikipedia.org/ruwiki/w/index.php?title=Электрофорез_белков&oldid=135379759