Метод Бредфорда: различия между версиями

Материал из Википедии — свободной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску
Интерактивная навигация по истории
[непроверенная версия][отпатрулированная версия]
← Предыдущая правка
Содержимое удалено Содержимое добавлено
ВизуальныйВики-текст
Просьба помочь дописать, где этот метод применяется
Нет описания правки
 
(не показано 35 промежуточных версий 21 участника)
Строка 1: Строка 1:
'''Метод Бредфорда''' — один из [[колориметрия (химический метод)|колориметрических]] методов количественного определения белков в растворе. Предложен биохимиком [[Бредфорд, Мерион|Мерионом Бредфорд]] ({{lang-en|[[:en:Marion M. Bradford]]}}) в [[1976 год]]у.<ref>Bradford, M. M. ([[1976]]) ''A Rapid and Sensitive Method for the Quantitation of Microgram Quantities of Protein Utilizing the Principle of Protein-Dye Binding''. Anal. Biochem. '''72''':248-254.</ref> Статья М. Бредфорд в журнале ''Anal Biochem'', посвящённая методу количественного определения белка в растворе, является ''одной из самых цитируемых'' научных статей в мире.
'''Метод Бредфорда''' — один из [[колориметрия (химический метод)|колориметрических]] методов количественного определения белков в растворе. Предложен биохимиком [[Бредфорд, Марион|Мерионом Бредфордом]] в [[1976 год]]у.<ref>Bradford, M. M. ([[1976]]) ''A Rapid and Sensitive Method for the Quantitation of Microgram Quantities of Protein Utilizing the Principle of Protein-Dye Binding''. Anal. Biochem. '''72''':248-254.</ref><ref>{{Cite web |url=https://news.uga.edu/marion-bradford-georgia-groundbreaker/ |title=Marion Bradford revolutionized research |access-date=2021-05-18 |archive-date=2021-05-18 |archive-url=https://web.archive.org/web/20210518104035/https://news.uga.edu/marion-bradford-georgia-groundbreaker/ |deadlink=no }}</ref> Статья М. Бредфорда в журнале ''Analytical Biochemistry'', посвящённая методу количественного определения белка в растворе, является ''одной из самых цитируемых'' научных статей в мире.
<!-- внимание — Мэрион Бредфорд — мужчина -->
<!-- внимание — Мэрион Бредфорд — мужчина -->


== Принцип ==
== Принцип ==
Метод основан на реакции красителя [[кумасси]] (Coomassie Brilliant Blue G-250) с [[аргинин]]ом и [[гидрофобность|гидрофобными]] [[аминокислота|аминокислотными]] остатками. Связанная форма имеет голубую окраску с максимумом поглощения при 595 нм. Таким образом увеличение [[адсорбция|адсорбции]] раствора при длине волны, равной 595 нм, пропорционально количеству белка в растворе.<ref>{{книга |автор=Кнорре Д. Г., Мызина С. Д. |часть= |заглавие=Биологическая химия |оригинал= |ссылка= |ответственный= |издание=3 |место=Москва |издательство=Высшая школа |год =2000 |том = |страницы= |страниц=479 |серия= |isbn=5060037207 |тираж=7000 }}</ref>
Метод основан на реакции красителя [[кумасси]] (Coomassie Brilliant Blue G-250) с [[аргинин]]ом и [[гидрофобность|гидрофобными]] [[аминокислота|аминокислотными]] остатками. Связанная форма имеет голубую окраску с максимумом поглощения при 595 нм. Таким образом увеличение [[спектрофотометрия|светопоглощения]] раствора при длине волны, равной 595 нм, пропорционально количеству белка в растворе.<ref>{{книга |автор=Кнорре Д. Г., Мызина С. Д. |часть= |заглавие=Биологическая химия |оригинал= |ссылка= |ответственный= |издание=3 |место=Москва |издательство=Высшая школа |год =2000 |том = |страницы= |страниц=479 |серия= |isbn=5060037207 |тираж=7000 }}</ref>


Метод даёт хорошее значение концентрации белка в пределах от 2 мкг/мл до 120 мкг/мл (в этих границах соблюдается линейная зависимость увеличения адсорбции от концентрации, в целом чувствительность метода зависит от соотношения концентраций определяемого белка и красителя: чем больше красителя, тем чувствительней метод), менее «капризный» по сравнению с [[метод Лоури|методом Лоури]].
Метод даёт хорошее значение концентрации белка в пределах от 2 мкг/мл до 120 мкг/мл (в этих границах соблюдается линейная зависимость увеличения абсорбции от концентрации, в целом чувствительность метода зависит от соотношения концентраций определяемого белка и красителя: чем больше красителя, тем чувствительней метод), менее «капризный» по сравнению с [[метод Лоури|методом Лоури]].

== Применение ==

{{В планах}}


== Другие методы ==
== Другие методы ==

Текущая версия от 07:18, 11 сентября 2024

Метод Бредфорда — один из колориметрических методов количественного определения белков в растворе. Предложен биохимиком Мерионом Бредфордом в 1976 году.[1][2] Статья М. Бредфорда в журнале Analytical Biochemistry, посвящённая методу количественного определения белка в растворе, является одной из самых цитируемых научных статей в мире.

Принцип

[править | править код]

Метод основан на реакции красителя кумасси (Coomassie Brilliant Blue G-250) с аргинином и гидрофобными аминокислотными остатками. Связанная форма имеет голубую окраску с максимумом поглощения при 595 нм. Таким образом увеличение светопоглощения раствора при длине волны, равной 595 нм, пропорционально количеству белка в растворе.[3]

Метод даёт хорошее значение концентрации белка в пределах от 2 мкг/мл до 120 мкг/мл (в этих границах соблюдается линейная зависимость увеличения абсорбции от концентрации, в целом чувствительность метода зависит от соотношения концентраций определяемого белка и красителя: чем больше красителя, тем чувствительней метод), менее «капризный» по сравнению с методом Лоури.

Другие методы

[править | править код]

Примечания

[править | править код]
  1. ↑ Bradford, M. M. (1976) A Rapid and Sensitive Method for the Quantitation of Microgram Quantities of Protein Utilizing the Principle of Protein-Dye Binding. Anal. Biochem. 72:248-254.
  2. ↑ Marion Bradford revolutionized research. Дата обращения: 18 мая 2021. Архивировано 18 мая 2021 года.
  3. ↑ Кнорре Д. Г., Мызина С. Д. Биологическая химия. — 3. — Москва: Высшая школа, 2000. — 479 с. — 7000 экз. — ISBN 5060037207.

Ссылки

[править | править код]
Источник — https://ru.wikipedia.org/ruwiki/w/index.php?title=Метод_Бредфорда&oldid=140104723