X-gal: различия между версиями

Материал из Википедии — свободной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску
Интерактивная навигация по истории
[отпатрулированная версия][отпатрулированная версия]
← Предыдущая правка
Содержимое удалено Содержимое добавлено
ВизуальныйВики-текст
Спасено источников — 1, отмечено мёртвыми — 0. Сообщить об ошибке. См. FAQ.) #IABot (v2.0.9.5
 
(не показано 14 промежуточных версий 7 участников)
Строка 1: Строка 1:
{{Вещество
{{Вещество
| заголовок = 5-бромо-4-хлоро-3-индоил-бета-D-галактопиранозид
| заголовок = <!-- заголовок карточки (по умолч. совпадает с назв. страницы) -->
| картинка = X-Gal.svg
| картинка = X-Gal.svg
| картинка3D = <!-- имя файла -->
| картинка3D = <!-- имя файла -->
Строка 9: Строка 9:
| сокращения = <!-- принятые сокращения названия -->
| сокращения = <!-- принятые сокращения названия -->
| хим. формула = C<sub>14</sub>H<sub>15</sub>BrClNO<sub>6</sub>
| хим. формула = C<sub>14</sub>H<sub>15</sub>BrClNO<sub>6</sub>
| эмпирическая формула = <!-- например: С{{sub|2}}H{{sub|6}}O -->
| отн. молек. масса = <!-- число, в а.е.м. -->
| молярная масса = 408,629
| молярная масса = 408,629


Строка 34: Строка 32:
| энтальпия образования = <!-- число, в кДж/моль -->
| энтальпия образования = <!-- число, в кДж/моль -->
| удельная теплота парообразования = <!-- число, в Дж/кг -->
| удельная теплота парообразования = <!-- число, в Дж/кг -->
| удельная теплота парообразования2= <!-- число, размерность -->
| удельная теплота плавления = <!-- число, в Дж/кг -->
| удельная теплота плавления = <!-- число, в Дж/кг -->
| удельная теплота плавления2 = <!-- число, размерность -->
| тепловое расширение = <!-- число (безразм.) -->
| тепловое расширение = <!-- число (безразм.) -->
| интервал трансформации = <!-- число, в ° -->
| интервал трансформации = <!-- число, в ° -->
Строка 74: Строка 70:
}}
}}


'''X-gal''' (также '''BCIG''' от {{lang-en|bromo-chloro-indolyl-galactopyranoside}}) — органическое соединение, состоящее из [[галактоза|галактозы]], соединенной с [[индол]]ом. Очень широко используется в качестве [[субстрат (биохимия)|субстрат]]а для [[бета-галактозидаза|бета-галактозидаз]] в [[генетическая инженерия|генетической инженерии]] и [[молекулярная биология|молекулярной биологии]].
'''X-gal''' (также '''BCIG''' от {{lang-en|bromo-chloro-indolyl-galactopyranoside}}) — органическое соединение, состоящее из [[галактоза|галактозы]], соединенной с [[индол]]ом. Очень широко используется в качестве [[субстрат (биохимия)|субстрата]] для [[бета-галактозидаза|бета-галактозидаз]] в [[генетическая инженерия|генетической инженерии]] и [[молекулярная биология|молекулярной биологии]].


== Uses ==
== Применение ==
{{Редактирую раздел|[[User:Sirozha|Sirozha.ru]]|[[User:Sirozha|Sirozha.ru]] 14:42, 11 декабря 2010 (UTC)}}


=== Клонирование ===
=== Клонирование ===
X-gal используют при клонировании генов для экспрессии в клетке гена фермента [[бета-галактозидаза|β-галактозидазы]], закодированного в [[lac-оперон|гене ''lacZ'']].
X-gal используют при клонировании генов для определения экспрессии в клетке гена фермента [[бета-галактозидаза|β-галактозидазы]], закодированного в [[lac-оперон|гене ''lacZ'']].


X-gal расщепляется β-галактозидазами, при этом образуется [[галактоза]] и 5-бромо-4-хлоро-3-гидроксииндол. Последний окисляется в 5,5'-дибромо-4,4'-дихлоро-индиго, нерастворимый окрашенный продукт. В чашку Петри или культуральный флакон вносят X-gal совместно с индуктором β-галактозидаз, например, [[IPTG]].
X-gal расщепляется β-галактозидазами, при этом образуется [[галактоза]] и 5-бромо-4-хлоро-3-гидроксииндол. Последний окисляется в 5,5'-дибромо-4,4'-дихлоро-индиго, нерастворимый окрашенный продукт. В чашку Петри или культуральный флакон вносят X-gal совместно с индуктором β-галактозидаз, например, [[IPTG]].


X-gal позволяет визуально определить, какие из колоний ''[[E. coli]]'' [[трансформация (биология)|трансформированы]] нужным вектором. В норме в клетках ''E. coli'' фермент, закодированный геном lacZ не синтезируется, поэтому синее окрашивание имеют только клетки, содержащие генно-инженерную конструкцию.
X-gal позволяет визуально определить, какие из колоний ''[[E. coli]]'' [[трансформация (биология)|трансформированы]] нужным вектором. В норме в клетках ''E. coli'' фермент, закодированный геном lacZ синтезируется под действием индуктора IPTG, а синее окрашивание теряется у клеток, содержащих генно-инженерную конструкцию, в которой ген lacZ нарушен в результате генетической вставки.


[[Файл:X-Gal reaction.png|550px]]
[[Файл:X-Gal reaction.png|550px]]


=== Репортер ===
=== Репортер ===
Ген ''lacZ'' может быть использован в качестве [[гены-репортеры|репортерного]], при условии выращивания бактерии или дрожжей на среде, содержащией X-gal. In [[two-hybrid analysis]] for example, it is necessary to distinguish between those yeast or bacteria in which there is a successful interaction, leading to the binding of an activation domain to a promoter, and those in which there is not. If the promoter is linked to a ''lacZ'' gene, the production of β-galactosidase will be indicated by the production of blue pigment by colonies that host a successful interaction.<!--
Ген ''lacZ'' может быть использован в качестве [[ген-репортер|репортерного]], при выращивания бактерии или дрожжей на среде, содержащей X-gal. В случае, когда промотор гена-мишени связан с кодирующей частью гена галактозидазы, связывание белка-активатора с промотором, приводит к образованию окрашенного продукта расщепления X-gal.<!--


⚫
--><ref name="joung">{{статья
--><ref name="joung">{{cite journal |author=Joung J, Ramm E, Pabo C |title=A bacterial two-hybrid selection system for studying protein-DNA and protein-protein interactions |journal=Proc Natl Acad Sci USA |volume=97 |issue=13 |pages=7382&ndash;7 |year=2000 |pmid=10852947 |url=http://www.pnas.org/cgi/content/full/97/13/7382
|заглавие=A bacterial two-hybrid selection system for studying protein-DNA and protein-protein interactions
⚫
|doi=10.1073/pnas.110149297 |pmc=16554 }}</ref><!--
|издание=[[Proceedings of the National Academy of Sciences|Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America]]
|том=97
|номер=13
|страницы=7382—7387
|pmid=10852947
|ссылка=http://www.pnas.org/cgi/content/full/97/13/7382
⚫
|doi=10.1073/pnas.110149297
|pmc=16554
|язык=en
|тип=journal
|автор=Joung J., Ramm E., Pabo C.
|год=2000
|archivedate=2008-05-02
|archiveurl=https://web.archive.org/web/20080502172825/http://www.pnas.org/cgi/content/full/97/13/7382
}}</ref>


=== Исследование воды ===
--> Due to its manual nature, this technique is limited to situations in which the number of colonies that must be distinguished is less than around 10<sup>6</sup>.<!--
X-Gal используют для определения ''E. coli'' и родственных бактерий в образцах воды.

⚫
--><ref name="joung"/><!--

--> The successful cleavage of X-gal also creates a noticeably foul odor due to the volatilization of [[indole]].

=== Water testing ===
In addition to use in molecular biology, X-Gal is used to determine ''E. coli'' and [[coliform]] content in drinking water samples.


== Примечания ==
== Примечания ==
{{примечания}}
{{примечания}}

{{mol_bio-stub}}


[[Категория:Методы молекулярной биологии]]
[[Категория:Методы молекулярной биологии]]

[[de:5-Brom-4-chlor-3-indoxyl-β-D-galactopyranosid]]
[[en:X-gal]]
[[es:X-gal]]
[[fr:X-gal]]
[[it:X-gal]]
[[ja:5-ブロモ-4-クロロ-3-インドリル-β-D-ガラクトピラノシド]]

Текущая версия от 05:52, 17 июня 2023

5-​бромо-​4-​хлоро-​3-​индоил-​бета-​D-​галактопиранозид
Изображение химической структуры
Общие
Систематическое
наименование		 5-​бромо-​4-​хлоро-​3-​индоил-​бета-​D-​галактопиранозид
Хим. формула C14H15BrClNO6
Физические свойства
Молярная масса 408,629 г/моль
Классификация
Рег. номер CAS 7240-90-6
PubChem 65181
Рег. номер EINECS 230-640-8
SMILES
 
InChI
 
ChEBI 75055
ChemSpider 58680
Приведены данные для стандартных условий (25 °C, 100 кПа), если не указано иное.
Логотип Викисклада Медиафайлы на Викискладе

X-gal (также BCIG от англ. bromo-chloro-indolyl-galactopyranoside) — органическое соединение, состоящее из галактозы, соединенной с индолом. Очень широко используется в качестве субстрата для бета-галактозидаз в генетической инженерии и молекулярной биологии.

Применение

[править | править код]

Клонирование

[править | править код]

X-gal используют при клонировании генов для определения экспрессии в клетке гена фермента β-галактозидазы, закодированного в гене lacZ.

X-gal расщепляется β-галактозидазами, при этом образуется галактоза и 5-бромо-4-хлоро-3-гидроксииндол. Последний окисляется в 5,5'-дибромо-4,4'-дихлоро-индиго, нерастворимый окрашенный продукт. В чашку Петри или культуральный флакон вносят X-gal совместно с индуктором β-галактозидаз, например, IPTG.

X-gal позволяет визуально определить, какие из колоний E. coli трансформированы нужным вектором. В норме в клетках E. coli фермент, закодированный геном lacZ синтезируется под действием индуктора IPTG, а синее окрашивание теряется у клеток, содержащих генно-инженерную конструкцию, в которой ген lacZ нарушен в результате генетической вставки.

Репортер

[править | править код]

Ген lacZ может быть использован в качестве репортерного, при выращивания бактерии или дрожжей на среде, содержащей X-gal. В случае, когда промотор гена-мишени связан с кодирующей частью гена галактозидазы, связывание белка-активатора с промотором, приводит к образованию окрашенного продукта расщепления X-gal.[1]

Исследование воды

[править | править код]

X-Gal используют для определения E. coli и родственных бактерий в образцах воды.

Примечания

[править | править код]
  1. ↑ Joung J., Ramm E., Pabo C. A bacterial two-hybrid selection system for studying protein-DNA and protein-protein interactions (англ.) // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America : journal. — 2000. — Vol. 97, no. 13. — P. 7382—7387. — doi:10.1073/pnas.110149297. — PMID 10852947. — PMC 16554. Архивировано 2 мая 2008 года.
Источник — https://ru.wikipedia.org/ruwiki/w/index.php?title=X-gal&oldid=131093400