Шоколадный агар: различия между версиями
Перейти к навигации
Перейти к поиску
| [непроверенная версия] | [непроверенная версия] |
Содержимое удалено Содержимое добавлено
Спасено источников — 4, отмечено мёртвыми — 0. Сообщить об ошибке. См. FAQ.) #IABot (v2.0.9.5 |
|||
| Строка 1: | Строка 1: | ||
[[Файл:Chocolate agar 1.jpg|thumb|right|230px|Культура {{lang-la|[[Francisella tularensis]]}}, выращенная на шоколадном [[Агар-агар|агаре]]]] |
[[Файл:Chocolate agar 1.jpg|thumb|right|230px|Культура {{lang-la|[[Francisella tularensis]]}}, выращенная на шоколадном [[Агар-агар|агаре]]]] |
||
'''Шокола́дный ага́р''' (''устар.'' ''агар с гретой кровью'') — представляет собой [[Питательная среда|питательную среду]], обогащённую лизированной высокой температурой кровью или [[гемоглобин]]ом, которая применяется для выделения и культивирования [[Патогенные бактерии|патогенных бактерий]] с высокими питательными потребностями<ref name="medical_dictionary">{{cite web|last=Segen|title=Chocolate agar: Definition|url=http://medical-dictionary.thefreedictionary.com/Chocolate+Agar|publisher=The Free Dictionary|lang=en|accessdate=2015-01-06}}</ref><ref name="Anderson">{{книга |заглавие=Great Adventures in the Microbiology Laboratory |издательство={{Нп3|Pearson Education|Pearson|en|Pearson Education}} |isbn=978-1-269-39068-2 |страницы=175 |издание=7th |язык=en |автор=Anderson, Cindy |год=2013}}{{ref-en}}</ref>. Питательная среда получила название за характерный цвет и не содержит в своём составе [[шоколад]] или [[Какао-порошок|какао]]. Условно шоколадный агар можно назвать разновидностью [[кровяной агар|кровяного агара]], однако эти среды различаются по назначению и способу приготовления. |
'''Шокола́дный ага́р''' (''устар.'' ''агар с гретой кровью'') — представляет собой [[Питательная среда|питательную среду]], обогащённую лизированной высокой температурой кровью или [[гемоглобин]]ом, которая применяется для выделения и культивирования [[Патогенные бактерии|патогенных бактерий]] с высокими питательными потребностями<ref name="medical_dictionary">{{cite web|last=Segen|title=Chocolate agar: Definition|url=http://medical-dictionary.thefreedictionary.com/Chocolate+Agar|publisher=The Free Dictionary|lang=en|accessdate=2015-01-06|archive-date=2014-11-15|archive-url=https://web.archive.org/web/20141115205200/http://medical-dictionary.thefreedictionary.com/chocolate+agar|url-status=live}}</ref><ref name="Anderson">{{книга |заглавие=Great Adventures in the Microbiology Laboratory |издательство={{Нп3|Pearson Education|Pearson|en|Pearson Education}} |isbn=978-1-269-39068-2 |страницы=175 |издание=7th |язык=en |автор=Anderson, Cindy |год=2013}}{{ref-en}}</ref>. Питательная среда получила название за характерный цвет и не содержит в своём составе [[шоколад]] или [[Какао-порошок|какао]]. Условно шоколадный агар можно назвать разновидностью [[кровяной агар|кровяного агара]], однако эти среды различаются по назначению и способу приготовления. |
||
== Состав и приготовление == |
== Состав и приготовление == |
||
В качестве основы шоколадного агара используют широкий спектр плотных питательных сред, применяемых в микробиологии<ref name="handbook">{{Книга|автор=Atlas, Ronald M., |заглавие=Handbook of microbiological media|ссылка=https://www.worldcat.org/oclc/938844680|издательство=Taylor & Francis|год=2010-01-01|isbn=9781439804087}}</ref>. К расплавленной стерильной основе добавляют 5-10 % крови животных и прогревают на [[водяная баня|водяной бане]] при температуре около 80 °C в течение 5 минут, для того чтобы [[Лизис|лизировать]] [[эритроциты]] и инактивировать ферменты, разрушающие [[Факторы роста X и V#Фактор V|фактор роста V]]. В некоторых случаях, например при использовании крови свиней или коз, температура прогревания может составлять 100 °C, а время прогревания увеличивают до 15 минут<ref>{{Статья|автор=Chandar Anand, Rhonda Gordon, Helene Shaw, Kevin Fonseca, Merle Olsen|заглавие=Pig and Goat Blood as Substitutes for Sheep Blood in Blood-Supplemented Agar Media|ссылка=http://jcm.asm.org/content/38/2/591|язык=en|издание=Journal of Clinical Microbiology|год=2000-02-01|том=38|выпуск=2|страницы=591—594|issn=0095-1137}}</ref>. |
В качестве основы шоколадного агара используют широкий спектр плотных питательных сред, применяемых в микробиологии<ref name="handbook">{{Книга|автор=Atlas, Ronald M., |заглавие=Handbook of microbiological media|ссылка=https://www.worldcat.org/oclc/938844680|издательство=Taylor & Francis|год=2010-01-01|isbn=9781439804087}}</ref>. К расплавленной стерильной основе добавляют 5-10 % крови животных и прогревают на [[водяная баня|водяной бане]] при температуре около 80 °C в течение 5 минут, для того чтобы [[Лизис|лизировать]] [[эритроциты]] и инактивировать ферменты, разрушающие [[Факторы роста X и V#Фактор V|фактор роста V]]. В некоторых случаях, например при использовании крови свиней или коз, температура прогревания может составлять 100 °C, а время прогревания увеличивают до 15 минут<ref>{{Статья|автор=Chandar Anand, Rhonda Gordon, Helene Shaw, Kevin Fonseca, Merle Olsen|заглавие=Pig and Goat Blood as Substitutes for Sheep Blood in Blood-Supplemented Agar Media|ссылка=http://jcm.asm.org/content/38/2/591|язык=en|издание=Journal of Clinical Microbiology|год=2000-02-01|том=38|выпуск=2|страницы=591—594|issn=0095-1137|archivedate=2020-09-02|archiveurl=https://web.archive.org/web/20200902114741/https://jcm.asm.org/content/38/2/591}}</ref>. |
||
Зачастую для приготовления шоколадного агара вместо крови используют стерилизованную в [[автоклав]]е [[Суспензия|суспензию]], приготовленную из сухого гемоглобина. В связи с тем, что гемоглобин не является полноценной заменой крови, в питательную среду добавляют синтетические ростовые добавки, содержащие [[Никотинамидадениндинуклеотид|НАД]], необходимый для роста бактерий рода ''Haemophilus'', а также витамины и вещества, стимулирующие рост [[гонококк]]ов и [[менингококк]]ов<ref name="handbook" /><ref>{{Статья|автор=J. E. Martin, T. E. Billings, J. F. Hackney, J. D. Thayer|заглавие=Primary isolation of N. gonorrhoeae with a new commercial medium |ссылка=https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1919970/|издание=Public Health Reports|год=1967-04-01|том=82|выпуск=4|страницы=361—363|issn=0094-6214}}</ref>. |
Зачастую для приготовления шоколадного агара вместо крови используют стерилизованную в [[автоклав]]е [[Суспензия|суспензию]], приготовленную из сухого гемоглобина. В связи с тем, что гемоглобин не является полноценной заменой крови, в питательную среду добавляют синтетические ростовые добавки, содержащие [[Никотинамидадениндинуклеотид|НАД]], необходимый для роста бактерий рода ''Haemophilus'', а также витамины и вещества, стимулирующие рост [[гонококк]]ов и [[менингококк]]ов<ref name="handbook" /><ref>{{Статья|автор=J. E. Martin, T. E. Billings, J. F. Hackney, J. D. Thayer|заглавие=Primary isolation of N. gonorrhoeae with a new commercial medium |ссылка=https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1919970/|издание=Public Health Reports|год=1967-04-01|том=82|выпуск=4|страницы=361—363|issn=0094-6214}}</ref>. |
||
| Строка 11: | Строка 11: | ||
Шоколадный агар используют для выращивания требовательных к [[Питательная среда|питательной среде]] [[Бактерия|бактерий]], таких как гонококк (''Neisseria gonorrhoeae'') и |
Шоколадный агар используют для выращивания требовательных к [[Питательная среда|питательной среде]] [[Бактерия|бактерий]], таких как гонококк (''Neisseria gonorrhoeae'') и |
||
''менингококк'' (''Neisseria meningitidis'')<ref name="pubmed271442">{{cite web|last=Gunn|first=B.A|title=Chocolate agar: A differential medium for gram positive cocci|url=https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC271442/|publisher=PubMed|lang=en|accessdate=2015-01-06}}</ref>. Кроме того, некоторые патогенные бактерии (в частности, ''Haemophilus influenzae'') нуждаются в дополнительных [[Факторы роста X и V|факторах роста V и X]]<ref name="springer"> |
''менингококк'' (''Neisseria meningitidis'')<ref name="pubmed271442">{{cite web|last=Gunn|first=B.A|title=Chocolate agar: A differential medium for gram positive cocci|url=https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC271442/|publisher=PubMed|lang=en|accessdate=2015-01-06|archive-date=2020-02-15|archive-url=https://web.archive.org/web/20200215032423/https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC271442/|url-status=live}}</ref>. Кроме того, некоторые патогенные бактерии (в частности, ''Haemophilus influenzae'') нуждаются в дополнительных [[Факторы роста X и V|факторах роста V и X]]<ref name="springer">{{Cite web |url=https://www.springer.com/life+sci/book/978-0-387-95040-2 |title=Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology{{ref-en}} |access-date=2017-10-03 |archive-date=2010-01-31 |archive-url=https://web.archive.org/web/20100131040746/http://www.springer.com/life+sci/book/978-0-387-95040-2 |url-status=dead }}</ref>, которые находятся внутри красных клеток крови ([[эритроцит]]ов). Для успешного выращивания таких бактерий необходимы [[Лизис|лизированные]] (разрушенные методом медленного нагревания) эритроциты. Температура в 80 °C также инактивирует [[фермент]]ы, которые могли бы [[метаболизм|метаболизировать]] NAD ([[Никотинамидадениндинуклеотид]]). |
||
В отличие от кровяного агара, при культивировании микроорганизмов на шоколадном агаре не происходит [[Кровяной агар#Гемолиз, вызываемый микроорганизмами на кровяном агаре|гемолиза]]. При этом, некоторые α- и β-гемолизирующие микроорганизмы, выделяющие [[перекись водорода]], образуют на шоколадном агаре зоны позеленения, сходные с α-гемолизом<ref>{{Статья|автор=Einar Leifson |заглавие=Types of Bacteria on Blood and Chocolate Agar and the Immediate Cause of These Types |ссылка=https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC533390/ |издание={{Нп3|American Society for Microbiology}} |год=1932 |том=24 |выпуск=6 |страницы=473—487 |issn=0021-9193 |язык=en |издательство={{Нп3|American Society for Microbiology}} }}</ref>. |
В отличие от кровяного агара, при культивировании микроорганизмов на шоколадном агаре не происходит [[Кровяной агар#Гемолиз, вызываемый микроорганизмами на кровяном агаре|гемолиза]]. При этом, некоторые α- и β-гемолизирующие микроорганизмы, выделяющие [[перекись водорода]], образуют на шоколадном агаре зоны позеленения, сходные с α-гемолизом<ref>{{Статья|автор=Einar Leifson |заглавие=Types of Bacteria on Blood and Chocolate Agar and the Immediate Cause of These Types |ссылка=https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC533390/ |издание={{Нп3|American Society for Microbiology}} |год=1932 |том=24 |выпуск=6 |страницы=473—487 |issn=0021-9193 |язык=en |издательство={{Нп3|American Society for Microbiology}} }}</ref>. |
||
Текущая версия от 05:01, 4 января 2024
Шокола́дный ага́р (устар. агар с гретой кровью) — представляет собой питательную среду, обогащённую лизированной высокой температурой кровью или гемоглобином, которая применяется для выделения и культивирования патогенных бактерий с высокими питательными потребностями[1][2]. Питательная среда получила название за характерный цвет и не содержит в своём составе шоколад или какао. Условно шоколадный агар можно назвать разновидностью кровяного агара, однако эти среды различаются по назначению и способу приготовления.
Состав и приготовление
[править | править код]В качестве основы шоколадного агара используют широкий спектр плотных питательных сред, применяемых в микробиологии[3]. К расплавленной стерильной основе добавляют 5-10 % крови животных и прогревают на водяной бане при температуре около 80 °C в течение 5 минут, для того чтобы лизировать эритроциты и инактивировать ферменты, разрушающие фактор роста V. В некоторых случаях, например при использовании крови свиней или коз, температура прогревания может составлять 100 °C, а время прогревания увеличивают до 15 минут[4].
Зачастую для приготовления шоколадного агара вместо крови используют стерилизованную в автоклаве суспензию, приготовленную из сухого гемоглобина. В связи с тем, что гемоглобин не является полноценной заменой крови, в питательную среду добавляют синтетические ростовые добавки, содержащие НАД, необходимый для роста бактерий рода Haemophilus, а также витамины и вещества, стимулирующие рост гонококков и менингококков[3][5].
Применение
[править | править код]
Шоколадный агар используют для выращивания требовательных к питательной среде бактерий, таких как гонококк (Neisseria gonorrhoeae) и менингококк (Neisseria meningitidis)[6]. Кроме того, некоторые патогенные бактерии (в частности, Haemophilus influenzae) нуждаются в дополнительных факторах роста V и X[7], которые находятся внутри красных клеток крови (эритроцитов). Для успешного выращивания таких бактерий необходимы лизированные (разрушенные методом медленного нагревания) эритроциты. Температура в 80 °C также инактивирует ферменты, которые могли бы метаболизировать NAD (Никотинамидадениндинуклеотид).
В отличие от кровяного агара, при культивировании микроорганизмов на шоколадном агаре не происходит гемолиза. При этом, некоторые α- и β-гемолизирующие микроорганизмы, выделяющие перекись водорода, образуют на шоколадном агаре зоны позеленения, сходные с α-гемолизом[8].
Добавление бацитрацина к шоколадному агару делает его элективной питательной средой, избирательной для рода Haemophilus. Вариант шоколадного агара Thayer-Martin содержит целый ассортимент антибиотиков и является элективной питательной средой для культивирования различных видов грамотрицательных диплококков рода Neisseria.
См. также
[править | править код]Примечания
[править | править код]- ↑ Segen Chocolate agar: Definition (англ.). The Free Dictionary. Дата обращения: 6 января 2015. Архивировано 15 ноября 2014 года.
- ↑ Anderson, Cindy. Great Adventures in the Microbiology Laboratory (англ.). — 7th. — Pearson[англ.], 2013. — P. 175. — ISBN 978-1-269-39068-2. (англ.)
- ↑ 1 2 Atlas, Ronald M.,. Handbook of microbiological media. — Taylor & Francis, 2010-01-01. — ISBN 9781439804087.
- ↑ Chandar Anand, Rhonda Gordon, Helene Shaw, Kevin Fonseca, Merle Olsen. Pig and Goat Blood as Substitutes for Sheep Blood in Blood-Supplemented Agar Media (англ.) // Journal of Clinical Microbiology. — 2000-02-01. — Vol. 38, iss. 2. — P. 591—594. — ISSN 0095-1137. Архивировано 2 сентября 2020 года.
- ↑ J. E. Martin, T. E. Billings, J. F. Hackney, J. D. Thayer. Primary isolation of N. gonorrhoeae with a new commercial medium // Public Health Reports. — 1967-04-01. — Т. 82, вып. 4. — С. 361—363. — ISSN 0094-6214.
- ↑ Gunn, B.A Chocolate agar: A differential medium for gram positive cocci (англ.). PubMed. Дата обращения: 6 января 2015. Архивировано 15 февраля 2020 года.
- ↑ Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology (англ.). Дата обращения: 3 октября 2017. Архивировано из оригинала 31 января 2010 года.
- ↑ Einar Leifson. Types of Bacteria on Blood and Chocolate Agar and the Immediate Cause of These Types (англ.) // American Society for Microbiology[англ.]. — American Society for Microbiology[англ.], 1932. — Vol. 24, iss. 6. — P. 473—487. — ISSN 0021-9193.