Электрофорез белков

Материал из Википедии — свободной энциклопедии
Это старая версия этой страницы, сохранённая Michael Romanov (обсуждение | вклад) в 23:48, 27 февраля 2015 (→Варианты метода электрофореза белков: викификация). Она может серьёзно отличаться от текущей версии.
Перейти к навигации Перейти к поиску
Отпатрулированная версия этой страницы, проверенная 27 февраля 2015, была основана на этой версии.
Белки дрожжей, разделённые с помощью электрофореза в полиакриламидном геле, с применением кумасси для окрашивания белковых фракций. В первой дорожке — белковый маркер молекулярной массы[1]
У этого термина существуют и другие значения, см. Электрофорез белков в полиакриламидном геле.

Электрофоре́з белко́в — способ разделения смеси белков на фракции или индивидуальные белки, основанный на движении заряженных белковых макромолекул различного молекулярного веса в стационарном электрическом поле. Электрофорез белков применяют как для анализа компонентов смеси белков, так и для получения гомогенного белка. Наиболее распространенным вариантом электрофоретического анализа белков является электрофорез белков в полиакриламидном геле по Лэммли[2][3].

Варианты метода электрофореза белков

Существует множество разновидностей и модификаций данного метода, которые используются (или использовались в определённые периоды развития биохимии и молекулярной биологии) в различных областях[3]:

Электрофорез белков подразделяется также на одномерный и двумерный (2D) электрофорез[6], препаративный и аналитический, а также электрофорез нативных белков и электрофорез в присутствии детергента (в денатурирующих условиях). Разновидностью метода электрофореза являются изоэлектрическое фокусирование и изотахофорез. В случае использования иммунологических методов для выявления разделённых белков говорят про иммуноэлектрофорез.

В зависимости от конструкции электрофоретического аппарата различают горизонтальный и вертикальный электрофорез белков.

История и области применения

После первых экспериментов с электрофорезом, проводившихся в нескольких лабораториях в 1930-е — 1940-е годы, существенный прогресс в дальнейшем развитии и применении этого метода для разделения белков начался в 1955 году с разработкой зонального электрофореза в крахмальном геле, которую осуществил Оливер Смитис, впоследствии нобелевский лауреат[4][7]. Метод совершенствовался[8][9] и получил самое широкое распространение в биологических исследованиях[10][11].

В 1959 году был предложен метод электрофореза белков в ПААГ[5], в 1962 году — метод диск-электрофореза[12], в 1969 году — применение денатурирующих агентов (SDS)[13]. В 1970 году Лэммли значительно усовершенствовал электрофорез в ПААГ, разделив 28 белковых компонентов бактериофага T4[2]. В 1975 году появился двухмерный (2D) электрофорез[6]. Ряд этих методик используются и поныне; например, 2D-электрофорез является одним из методов в протеомике.

См. также

Примечания

  1. ↑ Schägger H., von Jagow G. Tricine-sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis for the separation of proteins in the range from 1 to 100 kDa (англ.) // Analytical Biochemistry : журнал. — Orlando, FL, USA: Academic Press, 1987. — Vol. 166, no. 2. — P. 368—379. — ISSN 0003-2697. — doi:1016/0003-2697(91)90094-A[Ошибка: Неверный DOI!]. — PMID 2449095. (Дата обращения: 27 февраля 2015) Архивировано 27 февраля 2015.
  2. ↑ 1 2 Laemmli U. K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 (англ.) // Nature : журнал. — London, UK: Nature Publishing Group, 1970. — Vol. 227, no. 5259. — P. 680—685. — ISSN 1476-4687. — doi:10.1038/227680a0. — PMID 5432063. (Дата обращения: 27 февраля 2015) Архивировано 27 февраля 2015.
  3. ↑ 1 2 Остерман Л. А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот: электрофорез и ультрацентрифугирование (практическое пособие). — М.: Наука, 1981. — 288 с.
  4. ↑ 1 2 Smithies O. Zone electrophoresis in starch gels: group variations in the serum proteins of normal human adults (англ.) // The Biochemical Journal : журнал. — London, UK: Biochemical Society; Portland Press, 1955. — Vol. 61, no. 4. — P. 629—641. — ISSN 0264-6021. — PMID 13276348. (Дата обращения: 27 февраля 2015) Архивировано 27 февраля 2015.
  5. ↑ 1 2 Raymond S., Weintraub L. Acrylamide gel as a supporting medium for zone electrophoresis (англ.) // Science : журнал. — Washington, D.C., USA: American Association for the Advancement of Science, 1959. — Vol. 130, no. 3377. — P. 711. — ISSN 0036-8075. — PMID 14436634. (Дата обращения: 27 февраля 2015) Архивировано 27 февраля 2015.
  6. ↑ 1 2 O'Farrell P. H. High resolution two-dimensional electrophoresis of proteins (англ.) // The Journal of Biological Chemistry : журнал. — Baltimore, MD, USA: American Society for Biochemistry and Molecular Biology, 1975. — Vol. 250, no. 10. — P. 4007-4021. — ISSN 4406-4412. — PMID 236308.
  7. ↑ Electrophoresis: Theory, Methods and Applications / Ed. by M. Bier. — 3rd printing edn. — New York, NY, USA: Academic Press, 1964. — P. 225. — 563 p. (Дата обращения: 27 февраля 2015) Архивировано 27 февраля 2015.
  8. ↑ Smithies O. An improved procedure for starch-gel electrophoresis: further variations in the serum proteins of normal individuals (англ.) // The Biochemical Journal : журнал. — London, UK: Biochemical Society; Portland Press, 1959. — Vol. 71, no. 3. — P. 585—587. — ISSN 0264-6021. — PMID 13638269. (Дата обращения: 27 февраля 2015) Архивировано 27 февраля 2015.
  9. ↑ Gahne B. Studies on the inheritance of electrophoretic forms of transferrins, albumins, prealbumins and plasma esterases of horses (англ.) // Genetics : журнал. — Baltimore, MD, USA: Genetics Society Of America, 1966. — Vol. 53, no. 4. — P. 681—694. — ISSN 0016-6731. — PMID 5960258. (Дата обращения: 27 февраля 2015) Архивировано 27 февраля 2015.
  10. ↑ Baker C. M. A. Molecular genetics of avian proteins. IX. Interspecific and intraspecific variation of egg white proteins of the genus Gallus (англ.) // Genetics : журнал. — Baltimore, MD, USA: Genetics Society Of America, 1968. — Vol. 58, no. 2. — P. 211—226. — ISSN 0016-6731. — PMID 5960258. (Дата обращения: 27 февраля 2015) Архивировано 27 февраля 2015.
  11. ↑ Baker C. M. A., Croizier G., Stratil A., Manwell C. Identity and nomenclature of some protein polymorphisms of chicken eggs and sera (англ.) // Advances in Genetics : журнал. — New York, NY, USA: Academic Press, 1970. — Vol. 15. — P. 147—174. — ISSN 0065-2660. — PMID 4936422. (Дата обращения: 27 февраля 2015) Архивировано 27 февраля 2015.
  12. ↑ Ornstein L., Davis B. J. Disc Electrophoresis. — Rochester, NY, USA: Distillation Products Industries, Eastman Kodak Co., 1962.
  13. ↑ Weber K., Osborn M. The reliability of molecular weight determinations by dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (англ.) // The Journal of Biological Chemistry : журнал. — Baltimore, MD, USA: American Society for Biochemistry and Molecular Biology, 1969. — Vol. 244, no. 16. — P. 4406-4412. — ISSN 0021-9258. — PMID 5806584. (Дата обращения: 27 февраля 2015) Архивировано 27 февраля 2015.

Литература

  • Hunter R. L., Merkert C. L. Histochemical demonstration of enzymes separated by zone electrophoresis in starch gels // Science. — 1957. — Vol. 125. — P. 1294—1295.

Ссылки

  • Allozyme Electrophoresis Techniques (англ.). Fishing: Research: Gene Conservation Lab. Division of Commercial Fisheries, Alaska Department of Fish and Game, State of Alaska. — Пособие по электрофорезу в крахмальном геле. Дата обращения: 27 февраля 2015. Архивировано 27 февраля 2015 года.
Источник — https://ru.wikipedia.org/ruwiki/w/index.php?title=Электрофорез_белков&oldid=68910831