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Biolística

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Cañón de ADN.

La biolística, también mal llamada biobalística, es un método de transferencia directa de genes en una célula, con el objetivo de crear organismos transgénicos. Es el método de transferencia directa más utilizado para transformar las células vegetales.[1]​ Consiste en propulsar los genes de interés dentro de las células con la ayuda de un cañón de ADN, con lo cual se modifica el ADN de las células.

El término biolística deriva de un juego de palabras con la palabra balística.

Principios

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Se utilizan microesferas de metal cubiertas de ADN (bolas de oro o tungsteno de un micrómetro de diámetro). Se proyectan a enorme velocidad sobre las células que deben modificarse con el fin de cruzar su pared. Estas bolas se retrasarán progresivamente cruzando las distintas capas celulares. Algunas de las células alcanzadas van entonces a integrar espontáneamente los genes en su genoma. Pero el núcleo de la célula incluye el ADN de manera aleatoria.

Según las especies, el período que ha de transcurrir antes de obtener una raza transgénica estable puede variar de algunos días a varios meses. Este método se utiliza también para efectuar la transformación de los genomas de orgánulos, cloroplastos o mitocondrias. La transformación por biolística es una alternativa interesante a la transformación de las plantas por Agrobacterium tumefaciens, ya que no requiere secuencias exógenas para permitir la integración del fragmento de ADN.

Véase también

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Bibliografía

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  • OGM Description - Méthodes d'obtention - Domaines d'application, Francine Casse et Jean-Christophe Breitler, Ed France Agricole, 2001
  • Sanford, J. C., T. M. Klein, et al. (1987). "Delivery of substances into cells and tissues using a particle bombardment process." Journal of Particulate Science and Technology 5: 27-37.
  • Klein, T. M., E. D. Wolf, et al. (1987). "High-velocity microprojectiles for delivering nucleic-acids into living cells." Nature 327(6117): 70-73.
  • Ishida, Y., Y. Hiei, et al. (2007). "Agrobacterium-mediated transformation of maize." Nature Protocols 2(7): 1614-1621.
  • Ishida, Y., H. Saito, et al. (1996). "High efficiency transformation of maize (Zea mays L.) mediated by Agrobacterium tumefaciens." Nature Biotechnology 14(6): 745-750.
  • Tingay, S., D. McElroy, et al. (1997). "Agrobacterium tumefaciens-mediated barley transformation." Plant Journal 11(6): 1369-1376.
  • Frame, B. R., H. Y. Zhang, et al. (2000). "Production of transgenic maize from bombarded type II callus: Effect of gold particle size and callus morphology on transformation efficiency." In Vitro Cellular & Developmental Biology-Plant 36(1): 21-29.
  • Gan W, Grutzendler J, Wong WT, Wong ROL, Lichtman JW, Multicolor DiOlistic Labeling of the Nervous System Using Lipophilic Dye Combinations Neuron Volume 27, Issue 2, 219-225

Referencias

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